بررسی خاصیت آنتی باکتریایی همولنف سوسری امریکایی با بکارگیری کروماتوگرافی مایع (hplc)

سوسری ها ، حداقل 250 میلیون سال است که روی کره زمین حضور دارند و آنها از لحاظ تکاملی درسازگاری با عوامل محیطی مانند پاتوژن ها کاملا موفق بوده اند . داشتن پتانسیل بالا درمقابله با باکتری ها به آنها اجازه داده است که در مکان های بسیار آلوده مانند چاههای فاضلاب زندگی کنند . بنابراین ، این تحقیق بر این اساس بنا نهاده شده است که عوامل ضد باکتریایی در همولنف سوسری امریکایی ( periplaneta americana) و همچنین مکانیسم کنترل آلودگی و خصوصیات عامل یا عوامل مقابله کننده ، معین شود . سوسری ها از چاههای فاضلاب بیمارستان امام خمینی (ره) تهران و دانشگاه علوم پزشکی تهران جمع آوری شد و در انسکتاریوم دانشکده بهداشت نگه دار ی شدند . همولنف نمونه ها از قسمت کوکسال پاها جمع آوری گردید، سپس در 10000 g برا ی 20 دقیقه در دمای اطاق سانتریفیوژ شدند.سرم رویی و سلول های هموسیتی ته نشین شده برای تست آنتی بیوگرام بر علیه باکتری گرم مثبت( micrococcus luteus ) و باکتری گرم منفی ( escherichia coli) مورد استفاده قرار گرفتند . سپس همولنف ، با استفاده از کروماتوگرافی با کارایی بالا ( hplc) تجزیه شد و فراکشن ها به دست آمد . هر فراکشن برا ی حدود 10 ساعت در دستگاه فریز درایر قرار گرفت تا فاز متحرک آن ناپدید شود و پپتید/ پروتئین بدست آمده جداگانه برای تست آنتی بیوگرام بر علیه هردو باکتری مورد استفاده قرار گرفت .سرم همولنف سوسری امریکایی فعالیت آنتی بیوتیکی بر علیه هر دو باکتری نشان داد اما مشخصا برعلیه m. luteus در مقایسه با e. coli فعالیت بیشتری نمایان بود . اگرچه سلول های هموسیتی هیچگونه خاصیت آنتی بیوتیکی برعلیه e. coli نشان نداد ،فعالیت آنتی بیوتیکی بر علیه m. luteus مشاهده شد .به هر حال سرم همولنف، فعالیت ضد باکتریایی بالایی بر علیه باکتری گرم مثبت در مقایسه با باکتری گرم منفی نشان داد .فراکشن ها از سرم همولنف تهیه شد و فراکشن های 2و3 فعالیت آنتی باکتریایی بر علیه m. luteus نشان دادند ولی هیچگونه فعالیت ضدباکتریایی برعلیه e. coli مشاهده نشد .نتایج نشان دادند که احتمالا دو پروتئین یا پپتید ترشحی ، وقتی سوسری در مواجه با آلودگی باکتریایی قرار می گیرد مسئول مقابله در برابر باکتریها می باشند ، مخصوصا وقتی این فعالیت در همولنف نمونه های جمع آوری شده از چاههای فاضلاب بیمارستان امام خمینی در مقایسه با نمونه های موجود در انسکتاریوم ( درمعرض آلودگی کمتر ) مشاهده شد . نتیجه این که سوسری امریکایی بوسیله ترشح پپتید یا پروتئین های آنتی باکتریایی دارای توانایی مقابله با آلودگی باکتریایی می باشد . با توجه به فعالیت آنتی باکتریایی بالایی که ما یافتیم ، اینگونه پیشنهاد می شود که مطالعات بیشتری روی این مولکول ها انجام گیرد به طور یکه می توانند بعنوان گزینه مناسبی برای تهیه آنتی بیوتیک مطرح شوند .